解放军医学杂志

作者：丁毅,李敏,陈龙,张美林,冯树梅,

单位：1新疆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室，乌鲁木齐 830011 2新疆第二医学院基础医学院解剖组胚教研室，乌鲁木齐 830011 3新疆医科大学基础医学院技能中心，乌鲁木齐 830011 4新疆乌鲁木齐市中心血站，乌鲁木齐 830011

关键词：miR-125b-5p,ΔNp63α,细胞分化,角质形成细胞

基金：National Natural Science Foundation of China(81660324)；国家自然科学基金(81660324)；National Natural Science Foundation of China(81660521)；国家自然科学基金(81660521)

目的 探讨miR-125b-5p靶向ΔNp63α对角质形成细胞分化的影响及其机制。方法 用1.8 mmol/L氯化钙诱导角质形成细胞HaCaT，于氯化钙处理0、1、5、7 d，采用qRT-PCR检测miR-125b-5p、ΔNp63α、细胞角蛋白10(CK10)、外皮蛋白(Inv)、谷氨酰胺转移酶1(TG1)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的mRNA表达水平。于氯化钙处理0、5 d采用细胞免疫荧光分析ΔNp63α的表达情况。利用bibiserv网站预测miR-125b-5p与ΔNp63α的结合位点。用miR-125b-5p模拟物/抑制剂和阴性对照模拟物/抑制剂转染HaCaT细胞，培养5 d后，采用qRT-PCR和Western blotting检测ΔNp63α、CK10、Inv、TG1、PI3K、Akt和mTOR的mRNA和蛋白相对表达水平。结果 与氯化钙处理0 d时相比，处理1、5、7 d时miR-125b-5p相对表达水平明显下降(0.17±0.02、0.08±0.01、0.07±0.02 vs. 1.00±0.02，P<0.001)，而ΔNp63α、CK10、Inv、TG1、PI3K、Akt和mTOR mRNA相对表达水平逐渐升高(P<0.05)。细胞免疫荧光分析结果显示，与氯化钙处理0 d时相比，氯化钙处理5 d时角质形成细胞中ΔNp63α阳性细胞率增高(96.9%±0.9% vs. 43.2%±8.2%，P<0.001)。bibiserv网站预测结果显示，miR-125b-5p可与ΔNp63α的3'-UTR位点相结合。与阴性对照模拟物组相比，miR-125b-5p模拟物组ΔNp63α、CK10、Inv、TG1、PI3K、Akt和mTOR mRNA相对表达水平明显降低，且ΔNp63α、CK10、Inv、TG1、PI3K、Akt、p-Akt、mTOR和p-mTOR蛋白表达水平也明显降低(P<0.05)，而抑制miR-125b-5p的表达可逆转上述效应(P<0.05)。结论 miR-125b-5p靶向ΔNp63α可通过下调PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制角质形成细胞的分化。

来源：2022年第2期

《解放军医学》期刊编辑部

查看解放军医学杂志2022年第2期