解放军医学杂志

北大核心,CA,JST,Pж(AJ),CSCD

国内刊号:11-1056/R

国际刊号:0577-7402

解放军医学杂志2022年第2期:长链非编码RNA SNHG1对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

发布日期:

作者:万瑀,马芳,贺茜,马胜超,姜怡邓,沈江涌,

单位:1宁夏医科大学临床医学院,银川 750004 2国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室,银川 750004 3宁夏医科大学总医院烧伤整形外科,银川 750004 4宁夏医科大学基础医学院,银川 750004

关键词:增生性瘢痕,成纤维细胞,核仁小RNA宿主基因1,细胞增殖

基金:National Natural Science Foundation of China(81860555);国家自然科学基金(81860555);First-Class Discipline Construction Founded Project of Ningxia Medical University and the School of Clinical Medicine(NXYLXK2017A05);宁夏高等学校一流学科建设(宁夏医科大学国内一流建设学科临床医学)资助项目(NXYLXK

目的 探讨长链非编码RNA核仁小RNA宿主基因1(lncRNA SNHG1)对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法 纳入2019-2021年在宁夏医科大学总医院烧伤整形外科接受手术治疗的22例增生性瘢痕患者,收集其增生性瘢痕组织与瘢痕旁正常皮肤组织(瘢痕旁3 cm以内),从中分离培养成纤维细胞。采用qRT-PCR从组织和细胞水平检测SNHG1 mRNA和miR-382-3p相对表达水平。将增生性瘢痕成纤维细胞随机分为对照组、SNHG1阴性对照组(转染慢病毒空载体)、模拟物对照组(转染对照模拟物)、SNHG1阴性对照+模拟物对照组(转染慢病毒空载体和对照模拟物)、SNHG1过表达组(转染过表达慢病毒)、miR-382-3p过表达组(转染miR-382-3p模拟物)、SNHG1过表达+模拟物对照组(转染过表达慢病毒和对照模拟物)与SNHG1过表达+miR-382-3p过表达组(转染过表达慢病毒和miR-382-3p模拟物),采用qRT-PCR检测各组SNHG1、PCNA、p27 mRNA和miR-382-3p的相对表达水平;CCK-8法检测各组细胞增殖能力;EdU染色法检测各组细胞增殖水平;Western blotting检测各组p27和PCNA蛋白表达水平。结果 与正常皮肤组织及其成纤维细胞相比,SNHG1 mRNA在增生性瘢痕组织(3.21±2.65 vs.1.14±0.61,P<0.001)及其成纤维细胞中呈高表达(0.91±0.08 vs. 0.54±0.08,P<0.01),而miR-382-3p表达下调(组织:0.53±0.34 vs. 1.15±0.61,P<0.001;细胞:0.84±0.09 vs. 1.01±0.004,P<0.05)。与SNHG1阴性对照组相比,SNHG1过表达组细胞增殖能力增强(0.23±0.03 vs. 0.16±0.01,P<0.001),EdU阳性细胞百分比明显增高(30.01%±5.70% vs. 7.13%±4.40%,P<0.001),PCNA mRNA和蛋白相对表达水平增高(mRNA:2.97±0.33 vs. 0.98±0.25,P<0.01;蛋白:2.20±0.09 vs. 0.88±0.20,P<0.05),p27 mRNA和蛋白相对表达水平降低(mRNA:0.30±0.03 vs. 1.42±0.15,P<0.001;蛋白:0.47±0.11 vs. 1.13±0.19,P<0.05),miR-382-3p相对表达水平降低(0.05±0.01 vs. 1.03±0.12,P<0.001);与SNHG1过表达+模拟物对照组相比,SNHG1过表达+miR-382-3p过表达组细胞增殖能力减弱(0.15±0.02 vs. 0.26±0.01,P<0.001),EdU阳性细胞百分比下降(5.97%±0.33% vs. 11.70%±0.87%,P<0.001),PCNA mRNA和蛋白相对表达水平降低(mRNA:0.64±0.09 vs.3.33±0.38,P<0.001;蛋白:1.70±0.36 vs. 2.34±0.16,P<0.05),p27 mRNA和蛋白相对表达水平升高(mRNA:1.01±0.44 vs. 0.09±0.04,P<0.05;蛋白:1.38±0.31 vs. 0.50±0.09,P<0.05)。结论 SNHG1在增生性瘢痕中呈高表达,可负向调控miR-382-3p的表达,进而促进增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,有望成为治疗增生性瘢痕的新靶点。

来源:2022年第2期

《解放军医学》期刊编辑部

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