解放军医学杂志

作者：杨柳,刘强胜,张彬,何倩雯,李祯,刘安鹏,郑锋,詹佳,

单位：1武汉大学中南医院麻醉科，武汉 430071 2湖北文理学院附属医院/襄阳市中心医院麻醉科，湖北襄阳 441000

关键词：脓毒症,急性肺损伤,组织蛋白酶B,细胞焦亡

基金：Natural Science Foundation of Hubei Province(2019CFB690)；湖北省自然科学基金(2019CFB690)

目的 探讨组织蛋白酶B(CTSB)下调对脓毒症急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织细胞焦亡的影响。方法 SPF级健康雄性C57BL/6小鼠30只，随机分为假手术组(n=6)、脓毒症组(n=15)及脓毒症+组织蛋白酶B抑制剂CA-074组(脓毒症+CA-074组，n=9)。采用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒症模型。假手术组除不行盲肠结扎及穿孔外，其他操作同脓毒症组。脓毒症+CA-074组于造模后15 min腹腔注射10 mg/kg CA-074。造模后24 h，收集肺泡灌洗液进行白细胞计数，并采用ELISA法检测白细胞介素(IL)-18及IL-1β的浓度。收集肺组织，行HE染色及肺组织损伤评分，测定肺组织湿/干重比；采用RT-PCR检测各组肺组织中小凹蛋白-1(caveolin-1)、单核细胞趋化蛋白诱导蛋白1(MCPIP1)、组织蛋白酶B(CTSB)、半胱天冬酶(caspase)-1及成孔效应蛋白D(GSDMD)的mRNA表达水平；采用Western blotting测定各组肺组织中CTSB、caspase-1及GSDMD蛋白的表达水平。结果 假手术组小鼠观察期内无异常，术后24 h存活率100.0%。脓毒症组小鼠术后出现背部竖毛、行动迟缓、饮食不振及精神萎靡等症状，而这些症状在脓毒症+CA-074组小鼠中有所改善，两组术后24 h存活率分别为40.0%及66.7%。与假手术组比较，脓毒症组肺泡灌洗液中白细胞计数增加，炎性因子IL-18及IL-1β水平上升，肺组织湿/干重比及肺损伤评分增高，肺组织中caveolin-1 mRNA表达量上调，MCPIP1 mRNA表达量下调，CTSB、caspase-1及GSDMD蛋白表达上调，差异均有统计学意义(P<0.05)；与脓毒症组比较，脓毒症+CA-074组中白细胞计数减少，炎性因子水平降低，肺组织湿/干重比及肺损伤评分降低，caveolin-1 mRNA表达量下调，MCPIP1 mRNA表达量上调，焦亡相关蛋白表达明显下降，CTSB蛋白表达降低，差异有统计学意义(P<0.05)，而CTSB mRNA表达无明显变化(P=0.973)。结论 脓毒症肺损伤过程中肺组织CTSB表达增高，抑制CTSB的表达可通过减轻肺组织细胞焦亡而改善脓毒症急性肺损伤。

来源：2022年第3期

《解放军医学》期刊编辑部

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