解放军医学杂志

作者：王慧莲,展俊平,苗喜云,孟庆良,马俊福

单位：河南省中医院风湿病科，郑州 450000

关键词：丹酚酸B,类风湿关节炎,滑膜成纤维细胞,细胞增殖,细胞凋亡,自噬

基金：National Natural Science Foundation of China(81804050)；国家自然科学基金(81804050)；Traditional Chinese Medicine Scientific Research Project of Henan Province(20-21ZYZD05)；河南省中医药科学研究专项课题重大专项(20-21ZYZD05)；Henan Top Traditional Chinese Medicine Talent Training P

目的 探讨丹酚酸B对人类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 以不同浓度的丹酚酸B(0、1、10、20、30、40和50 μmol/L)处理人RA滑膜成纤维细胞MH7A，采用MTT法检测细胞增殖情况，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，筛选丹酚酸B的最适作用浓度。取MH7A细胞，设置对照组(正常培养)、丹酚酸B组(加入丹酚酸B培养)与丹酚酸B+3-MA组(加入丹酚酸B和5 mmol/L自噬抑制剂3-MA共培养)。采用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡情况；qRT-PCR检测caspase-3 mRNA相对表达水平；Western blotting检测caspase-3、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1和p62蛋白相对表达水平。结果 与0 μmol/L丹酚酸B组比较，30、40和50 μmol/L丹酚酸B处理的MH7A细胞增殖率明显降低(P<0.05)，凋亡率明显升高(P<0.05)，据此选择50 μmol/L丹酚酸B进行后续实验。与对照组比较，丹酚酸B组细胞增殖率、p62蛋白相对表达水平明显降低，细胞凋亡率、caspase-3 mRNA和蛋白以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05)；与丹酚酸B组比较，丹酚酸B+3-MA组细胞增殖率(63.47%±1.94% vs. 51.33%±4.67%)、p62蛋白相对表达水平(0.97±0.06 vs. 0.20±0.02)明显升高，细胞凋亡率(21.4%±1.8% vs.30.4%±0.6%)、caspase-3 mRNA(0.83±0.06 vs. 1.27±0.15)和蛋白(0.64±0.05 vs. 1.10±0.09)、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ(0.29±0.07 vs. 1.23±0.21)、Beclin-1(0.36±0.05 vs. 1.05±0.08)蛋白相对表达水平明显降低(P<0.05)。结论 丹酚酸B可能通过诱导自噬抑制人RA滑膜成纤维细胞的增殖并促进其凋亡。

来源：2022年第4期

《解放军医学》期刊编辑部

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