解放军医学杂志

作者：任璐,曹芹雪,杨少琴

单位：河南大学淮河医院妇产科，河南开封 475000

关键词：紫花前胡苷,宫颈癌,细胞侵袭,细胞迁移,上皮-间质转化,miR-324-3P/WNT3a轴

基金：Henan Province 2018 Science and Technology Development Plan Project(182102311175)；河南省2018年科技发展计划(182102311175)

目的 探讨紫花前胡苷(NDK)通过调控上皮-间质转化(EMT)影响宫颈癌细胞侵袭迁移的可能机制，并分析其对miR-324-3P/WNT3a轴的影响。方法 取对数生长期人宫颈癌HeLa细胞，分为4组：空白组(于37 ℃、5%CO2、饱和湿度培养箱中培养)、miR-324-3P inhibitor组(转染hsa-miR-324-3p inhibitor)、NDK组(加入20 mmol/L浓度的NDK培养)、miR-324-3P inhibitor+NDK组(转染miR-324-3P inhibitor后加入20 mmol/L浓度的NDK培养)，均处理48 h。采用Transwell实验检测各组细胞侵袭能力；细胞划痕实验检测各组细胞的迁移能力；qRT-PCR检测各组细胞中miR-324-3P、WNT3a mRNA表达水平；Western blotting检测各组EMT相关标志蛋白E-钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、WNT3a、β-catenin蛋白表达水平；双荧光素酶报告基因检测miR-324-3P与WNT3a基因的靶向关系。结果 与空白组比较，miR-324-3P inhibitor组HeLa细胞的穿膜细胞数增多，划痕愈合率增高，miR-324-3P mRNA表达水平下降，WNT3a mRNA表达水平升高，E-cadherin蛋白相对表达量降低，波形蛋白、N-cadherin、WNT3a和β-catenin蛋白相对表达量升高(P<0.05)；而NDK组、miR-324-3P inhibitor+NDK组HeLa细胞的穿膜细胞数减少，划痕愈合率降低，miR-324-3P mRNA表达水平升高，WNT3a mRNA表达水平降低，E-cadherin蛋白相对表达量升高，波形蛋白、N-cadherin、WNT3a和β-catenin蛋白相对表达量降低(P<0.05)；且NDK组上述各指标均低于miR-324-3P inhibitor+NDK组。双荧光素酶报告基因检测结果显示，miR-324-3P mimic可降低WNT3a WT荧光素酶活性(P<0.05)，但不影响WNT3a mut荧光素酶活性(P>0.05)。结论 NDK可通过调控EMT抑制宫颈癌细胞的侵袭及迁移，其作用机制可能与调节miR-324-3P/WNT3a轴有关。

来源：2022年第5期

《解放军医学》期刊编辑部

查看解放军医学杂志2022年第5期