解放军医学杂志

作者：李上,徐子瑛,于子惠5,冯韬锦,王中奇,李然,尹鹏滨,张里程,唐佩福,

单位：1解放军医学院，北京 100853 2解放军总医院第四医学中心骨科医学部，北京 100048 3国家骨科与运动康复临床医学研究中心，北京 100853 4首都儿科研究所，北京 100020 5中国科学院北京基因组研究所(国家生物信息中心)，北京 100101

关键词：成肌细胞,信号蛋白3A,转录组测序,骨骼肌损伤

基金：Science and Technology Young Talent Promotion Project(2020-JCJQ-033)；军事科技领域青年人才托举工程项目(2020-JCJQ-033)

目的 探讨信号蛋白3A(Sema3A)对成肌细胞功能的影响及其转录调控机制。方法 以1.0、0.1、0.01 µg/ml重组Sema3A蛋白作用成肌细胞，并设置对照组，采用动态活细胞成像及划痕实验检测细胞的增殖与迁移能力，RT-qPCR检测成肌分化因子的表达。对1.0 µg/ml重组Sema3A蛋白干预的成肌细胞及对照组细胞进行转录组测序，筛选差异表达基因并进行GO富集分析，对部分差异表达基因通过RT-qPCR进行转录水平验证。结果 IncuCyte细胞成像计数显示，Sema3A可促进成肌细胞增殖，其中1.0 µg/ml Sema3A组细胞计数较对照组升高17.36%(P<0.001)。划痕实验结果显示，Sema3A可使成肌细胞迁移能力明显增强，其中1.0 µg/ml Sema3A组细胞划痕愈合率较对照组升高69.66%(P<0.001)。RT-qRCR检测结果显示，Sema3A可上调部分成肌分化基因的表达，其中1.0 µg/ml Sema3A可使Myf5、MyoG基因表达分别升高37.47%±11.67%(P<0.01)、26.57%±11.31%(P<0.05)。生物信息学分析显示，Sema3A可上调成肌细胞转录组中的肌细胞与肌纤维发育、细胞与解剖结构成熟及成骨发育等相关功能通路，下调脂蛋白代谢与乳糜微粒等相关功能通路；RT-qPCR验证了富集通路中的部分差异表达基因，其中Prox1、Myh11表达分别升高22.48%±14.42%(P<0.05)、21.42%±5.81%(P<0.01)，LipC、ApoC2表达分别降低23.08%±15.38%(P<0.05)、55.97%±26.51%(P<0.05)。结论 外源性Sema3A蛋白可上调成肌细胞分化相关基因Myf5、MyoG的表达，且可能通过对骨骼肌发育、成熟与脂蛋白代谢等相关基因进行转录调控而促进成肌细胞的增殖、迁移。

来源：2022年第7期

《解放军医学》期刊编辑部

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