解放军医学杂志

作者：蒋英英,陈曦,石雨,应济丞,王笑笑,丁刚,

单位：1潍坊医学院口腔医学院，山东潍坊 261053 2潍坊医学院附属医院口腔科，山东潍坊 261035

关键词：口腔鳞状细胞癌,长链非编码RNA,COL11A1-208,增殖,侵袭

基金：National Natural Science Foundation of China(82103008)；国家自然科学基金(82103008)；Visiting Scholar Research Program of National Facility for Translational Medicine (Shanghai)(TMSF-2021-2-003)；转化医学国家重大科技基础设施（上海）访问学者计划(TMSF-2021-2-003)；2021 Youth Innovation Ta

目的 观察长链非编码RNA (lncRNA) COL11A1-208在口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞中的表达和定位，及其对OSCC细胞增殖和侵袭的影响。方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测COL11A1-208在CAL27、HN4、HN6等OSCC细胞系中的表达情况；通过RNA核质分离和荧光原位杂交(FISH)实验检测COL11A1-208在OSCC细胞中的定位。采用CAL27、HN4细胞建立COL11A1-208敲减组(SS-COL11A1-208组)和敲减对照组(SS-NC组)；采用HN4、HN6细胞建立COL11A1-208过表达组(LV-COL11A1-208组)和过表达对照组(LV-NC组)。采用CCK-8实验、平板克隆形成实验以及Transwell实验检测COL11A1-208表达改变对各组细胞增殖活性、克隆形成能力、迁移和侵袭能力的影响。qPCR和Western blotting检测COL11A1-208表达改变对COL11A1基因及上皮-间充质转化相关蛋白(上皮钙黏素、波形蛋白)表达的影响。采用裸鼠皮下移植瘤模型观察COL11A1-208表达对OSCC细胞体内增殖能力的影响。结果 qPCR结果显示，COL11A1-208在7个OSCC细胞系的相对表达量均明显高于正常对照细胞(P<0.05)。核质分离结果显示，CAL27、HN4、HN6细胞内COL11A1-208的胞核占比明显高于胞质占比(P<0.01)；FISH实验结果显示，COL11A1-208主要定位于细胞核。与SS-NC组比较，SS-COL11A1-208组COL11A1-208相对表达量明显降低(CAL27：0.225±0.030 vs. 1.000±0.000；HN4：0.393±0.028 vs. 1.000±0.000；P<0.01)；细胞增殖活性减弱(P<0.05)，细胞克隆形成能力降低(P<0.0001)，细胞穿膜数减少(P<0.05)。与LV-NC组比较，LV-COL11A1-208组COL11A1-208相对表达量明显升高(HN6：6524.216±3395.926 vs. 1.000±0.000；HN4：3486.230±743.908 vs.1.000±0.000；P<0.05)，细胞增殖活性增强(P<0.05)，细胞克隆形成能力增高(P<0.01)，细胞穿膜数增多(P<0.0001)。SS-COL11A1-208组COL11A1蛋白相对表达量明显低于SS-NC组(P<0.05)，而LV-COL11A1-208组则明显高于LV-NC组(P<0.01)。另外，与相应对照组比较，SS-COL11A1-208组上皮钙黏素表达增高(P<0.05)，波形蛋白表达降低(P<0.05)；LV-COL11A1-208组上皮钙黏素表达降低(P<0.05)，波形蛋白表达增高(P<0.01)。裸鼠皮下移植瘤模型实验显示，与相应对照组比较，ASO-COL11A1-208组皮下移植瘤重量和体积均减小(P<0.05)，LV-COL11A1-208组皮下移植瘤重量和体积均增大(P<0.05)。结论 COL11A1-208可促进OSCC细胞的增殖和侵袭能力，在OSCC发生与进展中发挥重要作用。

来源：2022年第9期

《解放军医学》期刊编辑部

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