解放军医学杂志

作者：刘达越,董小艳,徐灵博,张慧萍,全尚琨,马胜超,白永生,杨勇,5,李桂忠,

单位：1宁夏医科大学基础医学院，宁夏银川 750004 2国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室/宁夏血管损伤与修复研究重点实验室，宁夏银川 750004 3宁夏医科大学总医院产前诊断中心，宁夏银川 750004 4宁夏回族自治区人民医院神经内科，宁夏银川 750004 5宁夏回族自治区人民医院核医学科，宁夏银川 750004

关键词：同型半胱氨酸,TLR4/NF-κB信号通路,心肌细胞,细胞凋亡,增殖

基金：Youth Project of National Natural Science Foundation of China(81900273)；国家自然科学基金青年基金(81900273)；National Natural Science Foundation of China(81860044)；国家自然科学基金地区项目(81860044)；National Natural Science Foundation of China(8176009)；国家自然科学基金地区项目(8176009)；N

目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠心肌细胞凋亡、增殖的作用及其可能机制。方法 将大鼠心肌细胞分为对照组与Hcy组(用终浓度为3 mmol/L的Hcy刺激24 h)，采用Western blotting检测TLR4、髓样分化因子(MyD88)、NF-κB、磷酸化的NF-κB(p-NF-κB)，凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况，流式细胞术检测心肌细胞凋亡率，EdU染色观察心肌细胞增殖情况。将TLR4干扰片段转染心肌细胞，采用Western blotting检测TLR4表达情况，对干扰片段进行筛选和验证。将心肌细胞分为干扰片段空载体组(si-NC+Hcy组)与干扰TLR4组(si-TLR4+Hcy组)，并加入3 mmol/L的Hcy干预24 h，采用Western blotting检测心肌细胞MyD88、NF-κB、p-NF-κB，凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况，流式细胞术检测心肌细胞凋亡率，EdU染色观察心肌细胞增殖情况。结果 Western blotting检测结果显示，与对照组比较，Hcy组TLR4、MyD88、p-NF-κB及凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3表达水平升高(P<0.01)，抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平降低(P<0.01)；与si-NC+Hcy组比较，si-TLR4+Hcy组TLR4、MyD88、p-NF-κB及凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3的表达水平降低(P<0.01)，抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平升高(P<0.01)。流式细胞术检测结果显示，与对照组比较，Hcy组细胞凋亡率明显增高(P<0.01)；与si-NC+Hcy组比较，si-TLR4+Hcy组细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。EdU染色结果显示，与对照组比较，Hcy组EdU阳性细胞率明显降低(P<0.01)；与si-NC+Hcy组比较，si-TLR4+Hcy组EdU阳性细胞率明显增高(P<0.01)。结论 Hcy可诱导大鼠心肌细胞凋亡，抑制心肌细胞增殖，其机制可能与TLR4/NF-κB信号通路有关。

来源：2022年第10期

《解放军医学》期刊编辑部

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