解放军医学杂志

作者：蒋先训,张凯,张鹰

单位：南华大学衡阳医学院附属第二医院重症医学科，湖南衡阳 421000

关键词：miR-149-5p,缺血再灌注,成纤维细胞生长因子21,细胞凋亡

基金：Scientific Research Program of Hunan Provincial Health Commission(202213014836)；湖南省卫生健康委科研项目(202213014836)

目的 探究miR-149-5p与成纤维细胞生长因子21（FGF21）的靶向关系，及其对大鼠心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤的影响。方法 将10只C56BL/6J雄性小鼠构建缺血再灌注（I/R）模型，qRT-PCR法检测I/R小鼠心脏组织中miR-149-5p表达水平的变化。将培养至生长对数期的H9c2大鼠心肌细胞分为对照组、H/R组、H/R+miR-149-5p inhibitor组、H/R+miR-149-5p NC组、H/R+miR-149-5p mimics组、H/R+miR-149-5p mimics+FGF21组，并诱导H/R模型及转染处理。ELISA法检测H9c2细胞中乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）的活性；MTT法检测细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡情况；qRT-PCR检测细胞中miR-149-5p的表达水平；Western blotting检测Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、FGF21蛋白的表达水平；双荧光素酶测定miR-149-5p与FGF21的靶向关系。结果 与假手术组比较，I/R小鼠心脏组织中miR-149-5p表达水平明显升高（P<0.05）。与对照组比较，H/R组H9c2细胞凋亡率、LDH和CK活性及Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显升高（P<0.05），细胞活力及FGF21、Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与H/R组和H/R+miR-149-5p NC组比较，H/R+miR-149-5p inhibitor组细胞凋亡率、LDH和CK活性及Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显降低（P<0.05），细胞活力及FGF21、Bcl-2蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）；与H/R组比较，H/R+miR-149-5p mimics组细胞凋亡率、LDH和CK活性及Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显升高（P<0.05），细胞活力及FGF21、Bcl-2蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。与H/R+miR-149-5p mimics组比较，H/R+miR-149-5p mimics+FGF21组细胞凋亡率及LDH和CK活性均明显降低（P<0.05），细胞活力明显升高（P<0.05）。双荧光素酶检测结果显示miR-149-5p与FGF21基因有靶向调控关系。结论 miR-149-5p在I/R小鼠心肌组织中明显上调，可负向调控FGF21水平，导致H/R处理的大鼠心肌细胞活力下降、凋亡增加。

来源：2023年第3期

《解放军医学》期刊编辑部

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