解放军医学杂志

作者：姚宁丰,佘仁夏,舒艺璇,熊文丽,何晓英,

单位：1西南医科大学附属医院神经内科/神经系统疾病与脑功能实验室，四川泸州 646000 2隆昌市人民医院神经内科，四川隆昌 642150 3西南医科大学附属中医医院神经内科，四川泸州 646000

关键词：脑出血,小胶质细胞,Nrf2/HO-1信号通路,白藜芦醇

目的 探讨白藜芦醇（Res）对脑出血（ICH）后小胶质细胞功能的影响及其可能机制。方法 （1）动物实验：将12周龄SD大鼠随机分为对照组、ICH组和Res组（n=9）；每组随机分为术后6、24、72 h三个亚组（n=3）。ICH组采用自体血造模法建立ICH模型，对照组只进针而不注入自体血；Res组在ICH组的基础上腹腔注入50 mg/（kg.d）白藜芦醇。造模成功后6、24、72 h对大鼠行改良神经功能缺损评分（mNSS），采用组织切片和HE染色、尼氏染色、TUNEL染色及免疫荧光法观察大鼠脑组织Toll样受体4（TRL4）、CD36、血红素加氧酶1（HO-1）及抗核转录因子红系2相关因子2（Nrf2）蛋白表达情况。（2）细胞实验：取BV2小鼠小胶质细胞，分为对照组、Fe2+（FeSO4 10 μmol/L）组、Fe2++Res低剂量（25 μmol/L）组及Fe2++Res高剂量（50 μmol/L）组，培养至24、72 h时行Western blotting检测TLR4、CD36、Nrf2、p-Nrf2和HO-1蛋白表达水平，行细胞免疫荧光定位观察Nrf2蛋白。结果 （1）mNSS评分显示，对照组大鼠神经功能正常，ICH组有明显的神经功能障碍；ICH组大鼠mNSS分值明显高于对照组（P<0.01）；Res组大鼠24、72 h mNSS分值明显低于ICH组（P<0.05，P<0.01）。HE染色结果显示，ICH组大鼠脑组织中红细胞浸润、炎性细胞浸润增多，Res组脑组织中红细胞和炎性细胞浸润较ICH组改善。尼氏染色结果显示，ICH组大鼠脑组织尼氏小体溶解较对照组增多，Res组尼氏小体溶解较ICH组减少。TUNEL染色结果显示，ICH组大鼠脑组织神经细胞凋亡指数较对照组上升（P<0.05），而Res组大鼠脑组织神经细胞凋亡指数较ICH组降低（P<0.05）。免疫荧光染色结果显示，ICH组大鼠脑组织中TLR4、CD36、Nrf2及HO-1蛋白表达均高于对照组（P<0.05）；与同一时间点ICH组比较，Res组大鼠脑组织中TLR4表达下降（P<0.05），CD36、Nrf2和HO-1蛋白表达均上升（P<0.05）。（2）与对照组比较，Fe2+组BV2细胞TLR4、CD36、HO-1蛋白相对表达量增高（P<0.05），72 h时Nrf2和p-Nrf2表达量增高（P<0.05），细胞核内Nrf2蛋白表达量增高（P<0.01）；与Fe2+组比较，Fe2++Res低剂量组和Fe2++Res高剂量组TLR4表达量降低（P<0.001），CD36、HO-1、Nrf2、p-Nrf2和细胞核内Nrf2蛋白表达量增高（P<0.05）；与Fe2++Res低剂量组比较，Fe2++Res高剂量组HO-1、Nrf2、p-Nrf2和细胞核内Nrf2蛋白表达量均增高（P<0.05）。结论 白藜芦醇可改善脑出血大鼠的神经功能；脑出血后72 h内Fe2+激活的小胶质细胞主要表现为促炎功能；白藜芦醇可能通过调控Nrf2/HO-1信号通路，促进脑出血后小胶质细胞的功能向抗炎转变。

来源：2023年第4期

《解放军医学》期刊编辑部

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