解放军医学杂志

作者：陈琰,胡文慧,李兴元,姚金玲,孔德营

单位：遵义医科大学基础医学院生理学教研室，贵州遵义 563000

关键词：氰戊菊酯,氧化应激,线粒体损伤,睾酮,生殖毒性

基金：National Natural Science Foundation of China(31760339)；国家自然科学基金(31760339)；Science and Technology Plan of Guizhou Province(Qiankehe Basics-ZK[2022] General 594)；贵州省科技计划(黔科合基础-ZK[2022]一般594)

目的 探讨氰戊菊酯（Fen）对大鼠睾丸Leydig细胞睾酮合成的影响及其可能机制。方法 采用差速贴壁法分离提纯SD大鼠睾丸Leydig细胞。用0、25、50和100 μmol/L Fen处理Leydig细胞1、12和24 h，采用ELISA法检测睾酮水平。设置空白对照组（加入0.1% DMSO处理）、Fen暴露组（加入100 μmol/L Fen处理）、Fen+NAC组（加入100 μmol/L Fen和5 mmol/L NAC处理）、Fen+CsA组（加入100 μmol/L Fen和2 mmol/L CsA处理），给药后继续培养24 h。采用流式细胞仪检测活性氧（ROS）和线粒体膜电位变化，ELISA法检测睾酮水平及谷胱甘肽（GSH）、cAMP含量，化学发光法检测ATP含量，Western blotting检测超氧化物歧化酶（SOD）、类固醇激素合成急性调节蛋白（StAR）、3β-羟类固醇脱氢酶（3β-HSD）和细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶（CYP11A1）的表达。结果 选择100 μmol/L Fen处理24 h进行实验。与空白对照组比较，Fen暴露组Leydig细胞睾酮合成水平，GSH、SOD、ATP、cAMP含量，线粒体膜电位，以及StAR、3β-HSD、CYP11A1蛋白相对表达量明显降低（P<0.01），ROS含量明显升高（P<0.01）；与Fen暴露组比较，Fen+NAC组、Fen+CsA组Leydig细胞睾酮合成水平，GSH、SOD、ATP、cAMP含量，线粒体膜电位，以及StAR、3β-HSD、CYP11A1蛋白相对表达量明显升高（P<0.05或P<0.01），ROS含量明显降低（P<0.01）。结论 Fen可能通过诱导氧化应激引起大鼠睾丸Leydig细胞线粒体损伤，致使ATP和cAMP合成受阻，从而抑制依赖cAMP/PKA信号通路的睾酮合成相关蛋白和酶的表达，最终导致Leydig细胞睾酮合成障碍。

来源：2023年第4期

《解放军医学》期刊编辑部

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