解放军医学杂志

作者：刘绪,张欣冉,李堂华,周威,梁荷淼,高文珍,张娟,苗林,陈晓华,

单位：1中部战区总医院检验科，湖北武汉 430070 2湖北民族大学医学部基础医学院，湖北恩施 445000 3中部战区总医院生殖医学科，湖北武汉 430070 4南方医科大学第一临床医学院，广东广州 510280

关键词：宫颈癌,组蛋白去甲基化酶5C,转录组测序,染色质免疫共沉淀测序,Hippo-YAP1通路

基金：Scientific Research Project of Health Commission of Hubei Province(WJ2021M219)；湖北省卫健委科研项目(WJ2021M219)；Young Top-Notch Talent Cultivation Program of Hubei Province (HBP-[2021]10)；“湖北省青年拔尖人才培养计划”经费项目(鄂组函[2021]10号)；High Level Scientific Cultivation Proj

目的 探讨组蛋白去甲基化酶5C(KDM5C)通过Hippo-YAP1通路调控人宫颈癌发生的分子机制。方法 采用稳转过表达KDM5C蛋白的CaSki细胞系，应用转录组测序(RNA-Seq)技术进行全转录组测序分析差异表达基因，并对差异基因进行GO分析、KEGG分析和蛋白互作网络分析。随后用siRNA敲低KDM5C基因，并通过RT-qPCR和Western blotting等反向验证关键受调控基因Yes相关蛋白1(YAP1)的表达变化。对过表达KDM5C蛋白的CaSki细胞系通过染色质免疫共沉淀测序(ChIP-Seq)技术和ChIP-qPCR方法分析KDM5C蛋白对YAP1基因启动子区间甲基化状态的影响。结果 RNA-Seq分析显示，过表达KDM5C蛋白导致356个mRNA表达明显上调和335个mRNA表达明显下调(P<0.05)；GO富集分析显示，KDM5C蛋白主要参与机体各种生物发育过程；KEGG富集分析显示，KDM5C蛋白主要参与黏着斑连接、甾类激素生物合成、Hippo-YAP1信号通路、FoxO信号通路、凋亡和感染等过程。RT-qPCR分析结果显示，敲低基因KDM5C可上调YAP1基因的表达；Western blotting结果也显示，降低KDM5C蛋白的表达可同时上调YAP1和磷酸化YAP1的表达水平(P<0.05)。ChIP-Seq分析显示，过表达KDM5C蛋白可明显升高YAP1基因启动子区间的H3K4me1水平、并降低H3K4me3水平(P<0.05)，ChIP-qPCR分析也验证了这种表达变化(P<0.05)。结论 KDM5C蛋白可调控宫颈肿瘤细胞YAP1基因启动子的组蛋白H3K4me1/me3甲基化水平，进而影响YAP1基因的转录。YAP1蛋白作为Hippo-YAP1通路的核心因子，其表达改变直接影响细胞的黏附、增殖和凋亡等过程，进而参与宫颈癌的发生发展。

来源：2023年第9期

《解放军医学》期刊编辑部

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