解放军医学杂志

作者：孙报增,秦聪聪,张俊琦,王永凯,张文标,刘瑞波,白天原,张志辉,张宇丝,杨琨,姜东伯,

单位：1空军军医大学基础医学院免疫学教研室，陕西西安 710032 2空军军医大学基础医学院生物武器损伤防治药物重点实验室，陕西西安 710032 3空军医科大学唐都医院风湿科，陕西西安 710032 4空军军医大学基础医学院微生物学教研室，陕西西安 710032

关键词：汉滩病毒,糖蛋白,表位,计算机预测,免疫反应性

基金：General Program of National Natural Science Foundation of China(82073154)；国家自然科学基金面上项目(82073154)；Youth Program of National Natural Science Foundation of China(82203510)；国家自然科学基金青年项目(82203510)；Promotion Program of Air Force Medical University(2020XXXX

目的 筛选、鉴定并验证汉滩病毒(HTNV)包膜糖蛋白-N末端(Gn)上的免疫反应性表位。方法 通过UniProt数据库获取HTNV 76-118株Gn蛋白序列。采用IEDB、SMMPMBEC、NetMHCpan 4.1、SYFPEITHI、Rankpep算法预测表位亲和力，VaxiJen v2.0分析免疫原性，Blastp工具计算保守性，HPEPDOCK和EpiDOCK模拟pMHC对接，TBtools进行双向聚类分析，酶联免疫斑点(ELISpot)实验评价表位细胞免疫反应性。结果 通过UniProt数据库获得了HTNV76-118株Gn蛋白序列(PRO_0000036816)。整合5种亲和力算法，在小鼠H-2亚型中获得了61个优势表位，在人主要组织相容性复合物(MHC)-Ⅰ亚型中得到234个优势表位，MHC-Ⅱ亚型中得到212个优势表位；VaxiJen筛选分别获得H-2、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ亚型强免疫原性优势表位23、110、42个；进一步采用Blastp筛选获得高亲和力、强免疫原性、种间种内保守的MHC-Ⅰ类限制性表位3个，MHC-Ⅱ类限制性表位81个。双向分层聚类分析揭示了小鼠H2-d、H2-b和部分人类白细胞分化抗原(HLA)在提呈HTNV Gn表位上的相似性。ELISpot验证了5个表位具有较强的诱导脾细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)的能力。结论 预测并验证了HTNV Gn上的细胞免疫反应性表位，证实在MHC提呈中病毒抗原存在跨基因、种属、物种的交叉免疫反应性，为预防肾综合征出血热(HFRS)提供了新思路。

来源：2023年第9期

《解放军医学》期刊编辑部

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