解放军医学杂志

作者：符禹玄,陈君,赵富生,李媛媛,张可心,武庚,

单位：1牡丹江医学院第一临床医学院骨科，黑龙江牡丹江 157000 2牡丹江医学院组织学与胚胎学教研室，黑龙江牡丹江 157000

关键词：脊髓半横切损伤,神经调节蛋白1,骨髓基质干细胞,内质网应激,凋亡

基金：Research Project of the Health and Family Planning Commission of Heilongjiang Province(2019-383)；黑龙江省卫生健康委科研项目(2019-383)；Natural Science Foundation of Heilongjiang Province(LH2020H073)；黑龙江省自然科学基金(LH2020H073)；Traditional Chinese Medicine Research Proj

目的 探讨移植神经调节蛋白1(NRG1)基因修饰的骨髓基质干细胞(BMSCs)对大鼠脊髓半横切损伤(SCI)的修复作用及其可能机制。方法 分离培养大鼠BMSCs，转染NRG1基因，采用ELISA法测定BMSCs裂解液和培养液上清中NRG1蛋白含量，细胞计数法检测BMSCs增殖活性。43只健康8周龄SD大鼠，随机分为对照组(n=10)、SCI模型组(n=10)、BMSCs组(n=10)与NRG1-BMSCs组(n=13)。建立大鼠脊髓半横切损伤模型后，原位移植BMSCs和NRG1-BMSCs。移植第1、7、14、21、28天，采用BBB评分、斜板实验评估大鼠后肢运动功能；移植第7天，应用荧光显微镜观察移植细胞迁移及分布情况；移植第28天，采用HE染色和Nissl染色观察大鼠脊髓组织病理学变化，TUNEL染色检测脊髓组织细胞凋亡情况，Western blotting检测脊髓组织内质网应激相关蛋白[X-box结合蛋白1(XBP1)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、转录激活因子4(ATF4)、ATF6和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)]及凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]的表达。结果 成功分离培养BMSCs，并转染NRG1基因。ELISA法检测结果显示，NRG1-BMSCs裂解液和培养液上清中NRG1蛋白含量明显高于BMSCs，且呈时间依赖性(P<0.05)。NRG1-BMSCs增殖活性明显高于BMSCs(P<0.05)。移植第21、28天，NRG1-BMSCs组BBB评分及斜板倾斜角度均高于SCI模型组和BMSCs组(P<0.05)，但未恢复到对照组水平(P<0.05)。移植第28天，与SCI模型组和BMSCs组比较，NRG1-BMSCs组大鼠脊髓组织神经元核固缩减少，尼氏体密度增加，XBP1、CHOP、ATF4、ATF6、GRP78、Bax蛋白表达水平及TUNEL阳性细胞率明显降低(P<0.05)，Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论 移植NRG1基因修饰的BMSCs能够减轻SCI，促进大鼠运动功能恢复，其机制可能与增加BMSCs增殖活性、抑制脊髓组织细胞凋亡、减轻内质网应激反应有关。

来源：2024年第2期

《解放军医学》期刊编辑部

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