解放军医学杂志

作者：张智慧,高鸿霞,王国庆,侯巍,邹畅,芦小单,

单位：1吉林省人民医院精准分子医学中心，吉林长春 130000 2北华大学医学技术学院，吉林省吉林市 132000

关键词：血管内皮生长因子,卵泡发育,性类固醇激素,转录组测序

基金：Natural Science Foundation of Jilin Province(20240101007JC)；吉林省自然科学基金(20240101007JC)；Natural Science Foundation of Jilin Province(YDZJ202201ZYTS148)；吉林省自然科学基金项目(YDZJ202201ZYTS148)；Jilin Provincial Science and Technology Department Innovation Team Pro

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)对小鼠卵巢类固醇合成相关基因表达的影响及其机制。方法 利用四环素可逆调节VEGF表达的转基因小鼠模型，采用聚合酶链反应(PCR)法鉴定小鼠基因型，通过喂食强力霉素将20只小鼠分为VEGF表达正常组(Dox+)与VEGF表达抑制组(Dox-)(n=10)。采用Western blotting检测卵巢组织中VEGF蛋白的表达情况；荧光定量PCR检测VEGF、VEGF受体2(KDR)及已知在卵泡发育中发挥作用的基因卵泡刺激素(FSH)、抑制素B(INHBB) mRNA的表达情况。HE染色观察卵巢组织的变化。取小鼠卵巢组织提取总RNA进行转录组测序，并通过FPKM、log2FC值分析相关差异基因。结果 与Dox+组比较，Dox-组VEGF mRNA和蛋白水平明显降低，KDR mRNA水平明显降低(P<0.05)。HE染色结果显示，与Dox+组比较，Dox-组卵泡发育障碍，并出现闭锁卵泡。根据测序结果分析筛选出两组小鼠的卵泡发育相关基因、类固醇合成相关基因具有明显差异(P<0.05)；富集分析发现小鼠卵巢中VEGF主要参与调控卵巢类固醇生成等通路。荧光定量PCR结果显示，与Dox+组相比，Dox-组小鼠卵巢组织中卵泡发育相关基因(INHBB、FSHR)明显上调(P<0.05)，类固醇合成的关键基因(StAR、CYP11A1、3β-HSD)明显下调(P<0.05)，定量结果与测序结果基本一致。结论 VEGF抑制可使小鼠卵泡发育障碍，其可能的机制是通过下调卵巢类固醇合成相关基因FSH、INHBB的表达从而阻碍胆固醇代谢来实现的。

来源：2024年第6期

《解放军医学》期刊编辑部

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