解放军医学杂志

作者：刘建春,张红珍,王青,樊慧杰,宋丽娟,柴智,马存根,

单位：1山西中医药大学神经生物学研究中心/国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室，山西晋中 030619 2山西大同大学脑科学研究所，山西大同 037009

关键词：自身免疫性脑脊髓炎,黄芪甲苷,轴突生长抑制因子,凋亡,轴突再生

基金：National Natural Science Foundation of China(81903596)；国家自然科学基金(81903596)；Shanxi Science and Technology Innovation Young Talent Team Project(202204051001028)；山西省科技创新青年人才团队项目(202204051001028)；Medical Science and Technology Leading Team Project of Shan

目的 观察黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠轴突生长抑制因子A(Nogo-A)及其下游通路蛋白Rho相关卷曲螺旋激酶2(ROCK2)的影响，探究其对轴突修复和再生的促进作用机制。方法 采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55多肽(MOG35-55)皮下注射C57BL/6雌性小鼠制备EAE 模型；将小鼠随机分为EAE组、AS-Ⅳ组，每组8只。于免疫后第3天开始，EAE组腹腔注射PBS；AS-Ⅳ组腹腔注射AS-Ⅳ 30 mg/(kg.d)，1次/d，0.2 ml/次，连续给药25 d。免疫后第28天，取小鼠脊髓，采用免疫荧光法检测脊髓中生长相关蛋白43(GAP-43)、神经元核心抗原(NeuN)、微管相关蛋白2(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙结合衔接分子1(Iba1)的表达水平；实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测GAP-43、Nogo-A、Nogo 受体(NgR)基因mRNA 表达水平；Western blotting检测GAP-43、Nogo-A、ROCK2、磷酸化肌球蛋白磷酸酶(p-MYPT1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2关联X蛋白(Bax)表达水平。结果 与EAE组比较，AS-Ⅳ组小鼠脊髓中星形胶质细胞GFAP和小胶质细胞Iba1的阳性表达率均明显下降(P<0.01，P<0.001)；NeuN和MAP-2阳性表达率均增高(P<0.001，P<0.05)；抗凋亡因子Bcl-2表达水平增高(P<0.001)，促凋亡因子Bax表达水平降低(P<0.05)，Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05)；GAP-43蛋白表达水平增高(P<0.05)；神经再生抑制因子NgR和ROCK2 基因mRNA表达水平均下调(P<0.001，P<0.05)；Nogo-A、ROCK2和p-MYPT1蛋白表达水平均降低(P<0.05或P<0.001)。结论 AS-Ⅳ可通过抑制Nogo-A及其下游通路分子ROCK2，抑制EAE小鼠小胶质细胞和星形胶质细胞的激活及神经元凋亡，进而促进GAP-43、NeuN及MAP-2的表达，减轻神经元损伤，促进轴突修复和再生。

来源：2024年第8期

《解放军医学》期刊编辑部

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