解放军医学杂志

作者：李志刚,贺祺琛,周辉年,焦作义

单位：兰州大学第二医院普通外科，甘肃兰州 730030

关键词：Runt相关转录因子1,Ro24-7429,胃癌细胞,生物学功能,类器官

基金：National Natural Science Foundation of China(32170729)；国家自然科学基金(32170729)

目的 探究Runt相关转录因子1(RUNX1)在胃癌中作为特异分子标志物的潜力，以及使用小分子抑制剂Ro24-7429靶向调控RUNX1对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响。方法 利用GEPIA数据库分析RUNX1 mRNA在胃癌组织与正常胃组织中的表达差异；基于TCGA数据库中的RUNX1基因表达数据，绘制受试者工作特征(ROC)曲线，评估RUNX1作为胃癌生物标志物的潜在价值。2022年9月采集兰州大学第二医院普外科手术中6例胃癌患者的组织样本，提取组织蛋白，采用Western blotting检测RUNX1蛋白在胃癌组织及癌旁组织中的表达情况。采用Western blotting筛选RUNX1高表达的胃癌细胞株，评估小分子抑制剂Ro24-7429对RUNX1蛋白表达的抑制作用；采用CCK-8、克隆形成、细胞划痕、Transwell等实验评估Ro24-7429对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响；利用免疫组织化学染色检测胃癌组织中RUNX1蛋白的表达情况，基于高表达样本建立胃癌类器官模型，并对该模型进行HE和免疫组织化学染色加以验证；通过生物显微镜在固定区域进行连续观察，监测Ro24-7429对胃癌类器官生长的影响。结果 GEPIA数据库分析结果显示，RUNX1 mRNA在胃癌组织中的表达高于正常组织(P<0.05)；基于TCGA数据库中RUNX1的表达数据绘制的ROC曲线，曲线下面积(AUC)为0.956，提示RUNX1可作为一个高度敏感的诊断标志物；Western blotting检测结果显示，胃癌组织中RUNX1蛋白的表达明显高于癌旁组织(P<0.001)；在5种胃癌细胞系中，AGS和HGC27细胞株中RUNX1蛋白呈现高表达，靶向RUNX1的小分子抑制剂Ro24-7429在胃癌细胞中可抑制RUNX1的表达(P<0.001)；CCK-8、克隆形成、细胞划痕和Transwell等实验结果显示Ro24-7429可明显抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.001)；基于RUNX1高表达样本建立的胃癌类器官模型，其RUNX1的表达与原始组织高度一致；当使用Ro24-7429针对RUNX1进行靶向抑制时，胃癌类器官生长能力明显下降。结论 RUNX1在胃癌中具备潜在的生物标志物价值，利用Ro24-7429可特异性地抑制胃癌细胞中RUNX1的表达，进而在细胞系与类器官模型中明显抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为。

来源：2024年第12期

《解放军医学》期刊编辑部

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