解放军医学杂志

作者：贾佳,张林昌,张海霞

单位：天津市第五中心医院/北京大学滨海医院眼科，天津 300450

关键词：miR-373-3p,糖尿病视网膜病变,血管内皮生长因子A,高糖,人视网膜微血管内皮细胞

目的 探讨miR-373-3p在糖尿病视网膜病变(DR)中的作用及其机制。方法 收集2021年2月－2022年2月在天津市第五中心医院就诊的35例DR患者及35例非DR患者的血清，qRT-PCR检测miR-373-3p和血管内皮生长因子A(VEGFA) mRNA的表达情况。采用高糖(HG)处理人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)构建体外DR模型。将HRMEC分为对照组(5 mmol/L葡萄糖和25 mmol/L甘露醇处理)、HG组(30 mmol/L葡萄糖处理)、HG+miR-373-3p模拟物阴性对照(miR-con)组(转染miR-con后用30 mmol/L葡萄糖处理)、HG+miR-373-3p组(转染miR-373-3p后用30 mmol/L葡萄糖处理)、HG+miR-373-3p+vector组(转染miR-373-3p和vector后用30 mmol/L的葡萄糖处理)和HG+miR-373-3p+VEGFA组(转染miR-373-3p和VEGFA后用30 mmol/L葡萄糖处理)。采用qRT-PCR和Western blotting分析各组miR-373-3p和VEGFA mRNA及蛋白表达水平。采用CCK-8法、免疫荧光、Transwell实验、血管形成实验和Western blotting检测HRMEC的增殖、迁移及血管生成能力。采用双荧光素酶测定miR-373-3p与VEGFA之间的关系。结果 与非DR患者比较，DR患者血清中miR-373-3p表达水平明显降低(P<0.05)，VEGFA mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较，HG组HRMEC miR-373-3p表达水平明显降低(P<0.05)，VEGFA mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)，细胞活力、细胞增殖率以及增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)水平均增高(P<0.05)，迁移细胞数量和血管形成能力上升(P<0.05)。与HG+miR-con组比较，HG+miR-373-3p组HRMEC中miR-373-3p表达水平升高(P<0.05)，VEGFA表达水平降低(P<0.05)，细胞活力、细胞增殖率以及PCNA、Cyclin D1蛋白水平降低(P<0.05)，迁移细胞数量和血管形成能力下降(P<0.05)。与HG+miR-373-3p+vector组比较，HG+miR-373-3p+VEGFA组HRMEC VEGFA表达水平升高(P<0.05)，细胞活力、细胞增殖率以及PCNA、Cyclin D1蛋白水平均增高(P<0.05)，迁移细胞数量和血管形成能力上升(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测结果显示，miR-373-3p和VEGFA序列共转染后，HRMEC中荧光素酶活性降低(P<0.05)。结论 miR-373-3p在DR患者血清中低表达，其可能的机制是通过靶向VEGFA抑制HG诱导的HRMEC功能障碍。

来源：2025年第1期

《解放军医学》期刊编辑部

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