解放军医学杂志

作者：李亚杰,张航,聂黎虹,安康杰,杨尉鑫,田国林,赵瑞宁,

单位：1宁夏医科大学总医院泌尿外科，宁夏银川 750001 2巴中市中心医院泌尿外科，四川巴中 636000 3宁夏医科大学基础医学院，宁夏银川 750001 4宁夏回族自治区人民医院泌尿外科，宁夏银川 750001

关键词：甜菜碱,前列腺癌,化疗耐药,ABCB1

基金：Natural Science Foundation of Ningxia Hui Autonomous Region(2023AAC03668)；宁夏回族自治区自然科学基金(2023AAC03668)；Natural Science Foundation of Ningxia Hui Autonomous Region(2022AAC03506)；宁夏回族自治区自然科学基金(2022AAC03506)；Natural Science Foundation of Ningxia Hui Auto

目的 探讨甜菜碱(BET)抑制ATP结合盒转运蛋白B1(ABCB1)逆转前列腺癌(PCa)化疗耐药的作用及其机制。方法 培养PCa化疗敏感株C4-2B细胞，通过多西他赛(DTX)浓度梯度递增法建立PCa对DTX耐药株TaxR细胞，采用CCK-8法和集落形成实验检测C4-2B、TaxR细胞对DTX的耐药性，Western blotting、qRT-PCR检测ABCB1的表达情况。将TaxR细胞分为：(1)对照组、阴性对照组、siABCB1-1组与siABCB1-2组，采用Western blotting检测小干扰沉默ABCB1的效果，CCK-8法检测各组对DTX耐药性的差异；(2)不同浓度BET(0、100、200、400、600、800 mmol/L)组，采用CCK-8法检测细胞活性，Western blotting检测ABCB1蛋白的表达情况；(3)对照组、DTX组(20 nmol/L DTX处理)、BET组(200 mmol/L BET处理)与DTX+BET组(20 nmol/L DTX+200 mmol/L BET联合处理)，采用流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞周期，Western blotting检测凋亡相关蛋白(Bcl-2、BAX、c-caspase-3)的表达情况；(4)对照组、BET组(200 mmol/L BET处理)、渥曼青霉素(WM)组(100 μmol/L WM处理)与BET+WM组(200 mmol/L BET+100 μmol/L WM联合处理)，采用Western blotting检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)及ABCB1蛋白的表达情况；(5)对照组、BAY组(10 μmol/L BAY处理)、BET组(200 mmol/L BET处理)与BAY+BET组(10 μmol/L BAY+200 mmol/L BET联合处理)，采用Western blotting检测NF-κB p65、p-ikBα和ABCB1蛋白的表达情况。利用网络药理学联合转录组测序相关研究结果预测BET逆转化疗耐药的可能通路。结果 与C4-2B细胞相比，TaxR细胞对DTX的耐药性明显增强(P<0.01)，且高表达ABCB1(P<0.01)。siRNA沉默ABCB1后TaxR对DTX的耐药性被明显抑制(P<0.01)。200 mmol/L BET对TaxR细胞的抑制率低于20%，且可明显降低TaxR细胞中ABCB1蛋白的表达(P<0.05)。200 mmol/L BET与20 nmol/L DTX联合应用较二者单独应用细胞凋亡率增高，细胞周期S期比例增高，Bcl-2蛋白表达降低，BAX、c-caspase-3蛋白表达增高(P<0.01)；200 mmol/L BET与100 μmol/L WM联合应用时PI3K、Akt、ABCB1蛋白表达降低(P<0.01)；200 mmol/L BET与10 μmol/L BAY联合应用时NF-κB p65、p-ikBα、ABCB1蛋白表达降低(P<0.01)。结论 BET可能通过PI3K/Akt/NF-κB信号通路下调ABCB1的表达进而逆转TaxR化疗耐药。

来源：2025年第2期

《解放军医学》期刊编辑部

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