解放军医学杂志

作者：穆秉桃,郭敏芳,于婧文,曹佳蕾,杨凤君,贾思玮,苏琴,孟涛,马存根,尉杰忠,宋丽娟,

单位：1山西大同大学脑科学研究所/分子细胞免疫学大同市重点实验室，山西大同 037009 2山西大同大学医学院，山西大同 037009 3山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/神经生物学研究中心，山西晋中 030619 4大同市第五人民医院神经内科，山西大同 037009

关键词：远志皂苷元,脂多糖,小胶质细胞,NLRP3炎性小体,炎症反应

基金：National Natural Science Foundation of China(82004028)；国家自然科学基金(82004028)；Project of Key Research Laboratory of Traditional Chinese Medicine of Shanxi Province(zyyyjs2024027)；山西省中医重点实验室建设项目(zyyyjs2024027)；"Four Batches" Science and Technology Innovat

目的 探究远志皂苷元(SEN)通过核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)通路缓解小鼠小胶质细胞炎症反应的机制。方法 将BV2小鼠小胶质细胞随机分为对照组、模型组、SEN组与MCC950组。对照组细胞不做处理，模型组细胞加入1 μg/ml脂多糖(LPS)，SEN组细胞加入1 μg/ml LPS +4 μmol/L SEN，MCC950组加入1 μg/ml LPS +10 μmol/L MCC950，作用24 h。采用CCK-8法检测不同浓度SEN对BV2细胞活力的影响。采用Griess法测定上清液一氧化氮(NO)释放量；实时荧光定量PCR测定NLRP3、淋巴细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)、白细胞介素(IL)-1β和IL-18 mRNA的表达水平；免疫荧光染色检测ASC、IL-1β、Nrf2和血红素加氧酶-1(HO-1)的表达水平；Western blotting检测NLRP3、caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18、Nrf2、HO-1及核因子κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达水平。结果 CCK-8法检测结果显示，2~20 μmol/L SEN处理的BV2细胞活力与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较，模型组BV2细胞活力明显下降(P<0.05)；与模型组比较，4 μmol/L SEN组BV2细胞活力明显恢复(P<0.05)。Griess法检测结果显示，与对照组比较，模型组细胞NO释放量明显增加(P<0.01)；实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果显示，与对照组比较，模型组细胞NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β和IL-18 mRNA和蛋白表达水平均明显增高(P<0.05)；免疫荧光染色结果显示，与对照组比较，模型组细胞iNOS、NF-κB蛋白表达水平增高，Nrf2和HO-1表达水平下降，差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较，SEN组和MCC950组细胞NO释放量减少，NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA和蛋白表达水平降低，差异均有统计学意义(P<0.05)；SEN组iNOS和NF-κB表达水平降低，免疫荧光染色显示Nrf2易位到核内，Nrf2和HO-1蛋白表达明显增多，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SEN可缓解LPS诱导的小鼠小胶质细胞炎症反应，抑制NLRP3炎性小体的活化和表达，效果与炎性小体抑制剂MCC950相当；其机制可能与调控上游因子Nrf2和HO-1的表达有关。

来源：2025年第2期

《解放军医学》期刊编辑部

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