解放军医学杂志

作者：刘宝林,曹维福

单位：南阳市第一人民医院麻醉科，河南南阳 473000

关键词：沉默信息调节因子1,铁死亡,老年小鼠,七氟烷,认知功能

基金：Henan Province Science and Technology Research Project(2020SJB4)；河南省医学科技攻关计划(2020SJB4)

目的 探讨沉默信息调节因子1 (SIRT1)对七氟烷(SEV)麻醉老年小鼠术后认知功能障碍(POCD)的作用及其机制。方法 (1)将雄性C57BL/6老年(15月龄)小鼠随机分为对照组(n=8)与SEV组(n=24)，采用Western blotting检测小鼠2% SEV暴露后1、3、7 d海马组织中SIRT1的表达水平。(2)将15月龄雄性C57BL/6小鼠随机分为AAV-GFP组、AAV-SIRT1组、SEV+AAV-GFP组与SEV+AAV-SIRT1组，每组20只。将AAV-SIRT1载体和对照载体AAV-GFP分别转染至相应组别小鼠脑内；5 d后，相应组别小鼠在2% SEV中暴露5 h。采用Morris水迷宫实验评估小鼠SEV暴露前后的空间记忆功能，TUNEL染色分析海马神经元凋亡情况，Western blotting检测海马组织中SIRT1、胱氨酸转运蛋白SLC7A11 (xCT)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达水平。(3)将小鼠海马神经元分为对照组、AAV-SIRT1组、Fer-1组、SEV组、SEV+AAV-SIRT1组与SEV+铁死亡抑制剂亚铁素-1(Fer-1)组。SEV组、SEV+AAV-SIRT1组和SEV+Fer-1组神经元暴露在5% SEV中4 h，SEV+AAV-SIRT1组和SEV+Fer-1组在SEV暴露前分别进行AAV-SIRT1转染或Fer-1处理。采用碘化丙啶(PI)染色评估细胞死亡情况，ELISA法检测丙二醛(MDA)水平和铁含量，荧光探针检测活性氧(ROS)水平。结果 (1)Western blotting检测结果显示，与对照组比较，SEV组小鼠海马组织中SIRT1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。(2)Morris水迷宫实验结果显示，与AAV-GFP组比较，SEV+AAV-GFP组和SEV+AAV-SIRT1组逃逸潜伏期明显延长(P<0.05)，穿越原始平台的次数明显减少(P<0.05)；与SEV+AAV-GFP组比较，SEV+AAV-SIRT1组逃逸潜伏期明显缩短(P<0.05)，在第7天穿越原始平台的次数明显增多(P<0.05或P<0.01)。TUNEL染色、Western blotting和免疫组化检测结果显示，与AAV-GFP组比较，SEV+AAV-GFP组和SEV+AAV-SIRT1组小鼠海马神经元凋亡增多，Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达水平升高，Bcl-2、GPX4、xCT蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01或P<0.001)；与SEV+AAV-GFP组比较，SEV+AAV-SIRT1组小鼠海马神经元凋亡减少，Bax、cleaved-caspase3蛋白表达水平降低(P<0.05)，Bcl-2、GPX4、xCT蛋白表达水平升高(P<0.05)。(3)体外细胞实验中PI染色和ELISA法检测结果显示，与对照组比较，SEV组小鼠海马神经元PI阳性率、MDA水平和铁含量均明显增高(P<0.05或P<0.01或P<0.001)；与SEV组比较，SEV+AAV-SIRT1组和SEV+Fer-1组小鼠海马神经元PI染色阳性率、MDA水平、铁含量和ROS水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论 SEV麻醉可降低老年小鼠海马组织和神经元中SIRT1的表达水平；SIRT1上调可减轻SEV暴露诱导的神经元死亡和铁死亡。

来源：2025年第3期

《解放军医学》期刊编辑部

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