解放军医学杂志

作者：海燕,尚香玉,马俊旗,阿仙姑·哈斯木,

单位：1新疆医科大学第一附属医院病理科，新疆乌鲁木齐 830011 2新疆医科大学基础医学院，新疆乌鲁木齐 830011 3新疆医科大学第一附属医院妇科，新疆乌鲁木齐 830011

关键词：宫颈癌,肿瘤干细胞,NIMA互作肽基脯氨酰异构酶,上皮-间质转化

基金：National Natural Science Foundation of China(81960463)；国家自然科学基金(81960463)

目的 探讨宫颈癌细胞中肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)介导肿瘤细胞干性的作用及诱导上皮-间质转化(EMT)的分子机制。方法 选取宫颈癌细胞系Siha(鳞状细胞癌)、Hela(腺癌)细胞，采用慢病毒转染技术构建Pin1低表达稳转细胞株，根据不同处理分为3组：敲低组1(shPin1-1)、敲低组2(shPin1-2)及对照组(shPin1-NON)。采用qRT-PCR及Western blotting检测敲低Pin1后宫颈癌细胞中性别决定区Y转录因子2(SOX2)、醛脱氢酶1A1(ALDH1A1)、细胞黏附分子44(CD44) mRNA及蛋白的表达情况。以无血清成球法诱导宫颈癌成球细胞，以贴壁培养宫颈癌细胞为对照，并采用qRT-PCR及Western blotting检测SOX2、ALDH1A1、CD44 mRNA及蛋白的表达情况进行验证。采用球体形成实验检测Pin1敲低后各组宫颈癌细胞的球体形成情况，Transwell检测各组细胞的迁移、侵袭能力，qRT-PCR及Western blotting检测各组细胞中上皮属性蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、间质属性蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin)以及激活蛋白1(AP-1)转录复合物关键蛋白(c-Jun、c-Fos) mRNA及蛋白的表达情况。采用免疫荧光结合免疫共沉淀实验检测Pin1与c-Jun的相互作用及共定位情况。结果 Siha和Hela细胞中，下调Pin1后shPin1-1组及shPin1-2组Pin1、SOX2、ALDH1A1、CD44 mRNA及蛋白表达水平明显低于shPin1-NON组(P<0.05)；无血清宫颈癌球体细胞中SOX2、ALDH1A1及CD44 mRNA及蛋白表达水平明显高于宫颈癌贴壁细胞(P<0.05)。与shPin1-NON组比较，shPin1-1组、shPin1-2组细胞成球性及迁移、侵袭能力明显降低(P<0.05)，E-cadherin mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05)，而N-cadherin mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05)；shPin1-1组及shPin1-2组c-Jun、c-Fos mRNA及蛋白表达水平明显低于shPin1-NON组(P<0.05)。结论 下调Pin1可抑制宫颈癌细胞的干性和迁移、侵袭能力，Pin1可能通过介导AP-1调控宫颈癌细胞干性诱导EMT的发生。

来源：2025年第5期

《解放军医学》期刊编辑部

查看解放军医学杂志2025年第5期